安捷倫XDB-C8液相色譜柱

安捷倫XDB-C8液相色譜柱

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Agilent ZORBAX Eclipse XDB 色譜柱（C18、C8、苯基和氰基）提供四種鍵合固定相，用于方法開發優化。這些色譜柱可在寬pH 范圍(pH 2-9) 內提供良好的峰形，用一系列色譜柱可進行靈活的其他方法開發。Eclipse XDB 色譜柱可以在低pH (2-3) 條件下用于方法開發，且同樣的色譜柱還可以在中等pH (6-8) 范圍內用于方法開發。在中等pH 范圍內，殘留硅醇基活性更大，且更容易發生相互作用，造成峰拖尾。為了克服這些相互作用，Eclipse XDB 色譜柱通過工藝進行超密鍵合和雙封端，以覆蓋盡可能多的活性硅醇基。zui終堿性化合物在pH 2-9 范圍內具有出色的峰形。可提供粒徑為1.8、3.5、5 和7um 的Eclipse XDB 色譜柱，實現高速、高分離度、分析和制備放大分離。

ZORBAX Eclipse XDB-C8

ZORBAX Eclipse Plus C8 柱有幾種填料粒徑和柱尺寸，是提高效率的良好工具。它們分離酸性、中性和堿性化合物都有良好的峰形。是方法開發的*色譜柱。

Eclipse Plus C8 的選擇性

色譜柱的選擇要考慮到一些因素。選擇性是進行色譜柱選擇zui重要的因素之一。選擇性系數(α)是兩個峰的

相對保留值：α = k2 / k1在這里k2 和k1 分別是第二個洗脫出來的峰和*峰的保留因子，也稱容量因子。如果這兩個峰一起被洗脫，α 為1 ；對這兩個緊密相鄰的峰來說，選擇性接近１。選擇性，或峰間距，可以通過改變溫度、流動相或固定相（色譜柱）進行調節。因為選擇性體現了分析物與固定相/流動相之間的相互作用，所以難以理解、也很難預測，常常需要通過實驗進行優化。有各種柱子可供選擇，這是改變α的有力而容易的辦法，尤其是因穩定性、溶解度、pH 或其它局限無法改變流動相時。圖1 顯示了在同樣的色譜條件下，Eclipse

Plus C8 柱、Eclipse Plus C18 柱，和Eclipse XDBC8 柱的不同選擇性。Eclipse Plus C8 柱與EclipseXDB-C8 柱相比，雖然對三種非常難分離的化合物來說，α僅改變了6%，但分離度增加了1 倍，從1.23 增至2.42。

這些柱子都有相似之處，如，同樣以ZORBAX硅膠為基質，都采用的是安捷倫控制的生產技術，因此，可以預

計其洗脫順序也比較相似，如圖所示。但它們之間也有明顯的不同，例如，Eclipse Plus 柱和Eclipse XDB 柱采用的的硅膠處理和鍵合技術不同，C18 和C8的官能團也不同。這些差異反映為選擇性的不同，進而將改善分離度。對于a接近1 的緊密相鄰峰，a的微小變化將對分離度產生極大的影響，例如在這安捷倫XDB-C8液相色譜柱

個例子中，a 從1.07變為1.14，分離度就從1.15 增加到2.42。

堿性化合物的出色峰形

Eclipse Plus 柱（C8 和C18）的zui顯著的特點是分離各種類型樣品：酸性、堿性和中性樣品，都能得到出色的峰形。在上述例子的各圖中都列出了用美國藥典拖尾因子計算表示的峰形。每個例子中，都接近于理想狀態(1.0)。高性能+峰形，柱效和分離度+均歸功于全程嚴格控制的、改進的硅膠生產和鍵合技術。堿性化合物（特別是含氨基的分子）的高效反相色譜分離經常很困難。在低pH條件下(pH ＜ 3)，堿發生質子化(BH+)，因而水溶性很強，保留較差。在pH 7時，某些氨基可能仍然質子化，而其它的則失去其質子(B)。硅膠上沒有反應*的硅醇基呈離子型(SiO-)，將與質子化的離子樣品發生相互作用。這種離子交換二級反應將導致峰拖尾。在低pH 條件下，硅醇基未離子化(SiOH)，與堿性分析物不發生相互作用。Eclipse Plus進行了*的ZORBAX硅膠處理、封端和鍵合，降低了離子化硅醇基的相互作用，顯著改善了峰形。